ข้อมูล

13.7: เฮมิเดสโมโซม - ชีววิทยา


เฮมิเดสโมโซม โดยเฉพาะอย่างยิ่งพวกที่ยึดเซลล์เยื่อบุผิวกับเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของพวกมัน เป็นปฏิกิริยาการยึดติดที่แน่นที่สุดในร่างกายของสัตว์ การสัมผัสอย่างใกล้ชิดและโครงสร้างเสริมของหน้าสัมผัสเหล่านี้มีความสำคัญต่อความยืดหยุ่นในการป้องกันของชั้นเยื่อบุผิว จำอินทิกริน α6β4 ได้ไหม นั่นจะเป็นสิ่งที่เชื่อมโยงกับเส้นใยระดับกลางแทนที่จะเป็น f-actin ฟิลาเมนต์ระดับกลางดังที่เราได้กล่าวไปแล้วนั้นไม่ใช่ไดนามิก แต่มีความเสถียรพอๆ กับส่วนประกอบของเซลลูลาร์ พวกมันยังแข็งแรงมากและใช้เพื่อค้ำจุนความสมบูรณ์ของเซลล์ ดังนั้นจึงไม่น่าแปลกใจที่เห็นเส้นใยระดับกลางและอินทีกริน α6β4 มีบทบาทในเฮมิเดสโมโซม

ลักษณะเด่นของเฮมิเดสโมโซมคือแผ่นโลหะหนาแน่นอิเล็กตรอน สามารถคิดได้ว่าเป็นการเสริมแรงเพื่อที่ว่าเมื่อเยื่อบุผิวถูกยืดออก เซลล์ไม่เพียงแค่หลุดออกมาโดยเหลือส่วนหนึ่งของเยื่อหุ้มเซลล์ แผ่นโลหะประกอบด้วยโปรตีนหลายชนิด แต่ส่วนประกอบหลักคือ เพลกติน ซึ่งเป็นโปรตีนเชื่อมโยงที่ช่วยมัดเส้นใยขั้นกลาง และเชื่อมต่อเข้าด้วยกัน รวมทั้งองค์ประกอบโครงร่างโครงกระดูกอื่นๆ องค์ประกอบที่สำคัญอีกประการหนึ่งของแผ่นโลหะคือ BP230 ซึ่งเชื่อมต่อแผ่นโลหะกับเคราติน ที่ด้านนอกเซลล์ นอกเหนือจากอินทิกรินที่กล่าวถึงแล้ว ยังมีทรานส์เมมเบรนไกลโคโปรตีนที่เรียกว่า BP180 ซึ่งจับกับองค์ประกอบลามินินของเมมเบรนชั้นใต้ดินด้วย

BP230 และ BP180 ได้รับการตั้งชื่อตาม bullous pemphigoid ซึ่งเป็นโรค bullous ใต้ผิวหนังที่มีลักษณะเป็นพุพองเรื้อรังของผิวหนัง เป็นโรคภูมิต้านตนเองและการตอบสนองของแอนติบอดีที่ผิดปกติคือโปรตีน hemidesmosomal ทั้งสองนี้


Vito Quaranta แพทยศาสตรบัณฑิต

McKenna MT, Weis JA, Barnes SL, Tyson DR, Miga MI, Quaranta V, แยงกี้ลอฟ TE. แนวทางการสร้างแบบจำลองทางคณิตศาสตร์เชิงทำนายสำหรับการศึกษาการรักษา Doxorubicin ในมะเร็งเต้านม 3 เท่า ตัวแทนวิทย์. 2017 ก.ค. 7/18/2017 7(1): 5725 PMID: 28720897, PMCID: PMC5516013, PII: 10.1038/s41598-017-05902-z, DOI: 10.1038/s41598-017-05902-z, ISSN: 2045- 2322.

วูเท็นดีเจ, Quaranta V. แบบจำลองทางคณิตศาสตร์ของการควบคุมฟีโนไทป์ของเซลล์และการตั้งโปรแกรมใหม่: ทำให้เซลล์มะเร็งมีความอ่อนไหวอีกครั้ง!. ไบโอชิม. ชีวฟิสิกส์ Acta [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2017 เม.ย. 1867(2): 167-75. PMID: 28396217, PII: S0304-419X(17)30065-3, DOI: 10.1016/j.bbcan.2017.04.001, ISSN: 0006-3002

Hormuth DA, Weis JA, Barnes SL, Miga MI, Rericha EC, Quaranta V, แยงกี้ลอฟ TE. แบบจำลองการแพร่กระจายของปฏิกิริยาคู่กลไกที่รวมเอาความแตกต่างภายในเนื้องอกเพื่อทำนายการเติบโตของ glioma ในร่างกาย อินเทอร์เฟซ J R Soc. 2017 14 มี.ค. (128): PMID: 28330985, PMCID: PMC5378136, PII: rsif.2016.1010, DOI: 10.1098/rsif.2016.1010, ISSN: 1742-5662

Udyavar AR, Wooten DJ, Hoeksema M, Bansal M, Califano A, Estrada L, Schnell S, ไอริช JM, Massion PP, Quaranta V. ฟีโนไทป์ลูกผสมแบบใหม่ที่เปิดเผยในมะเร็งปอดชนิดเซลล์ขนาดเล็กโดยแบบจำลองเครือข่ายปัจจัยการถอดความที่สามารถอธิบายความแตกต่างของเนื้องอกได้ Cancer Res [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2017 มีนาคม 3/1/2017 77(5): 1063-74. PMID: 27932399, PMCID: PMC5532541, PII: 0008-5472.CAN-16-1467, DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-16-1467, ISSN: 1538-7445

Hardeman KN, Peng C, Paudel BB, Meyer CT, Luong T, Tyson DR, Young JD, Quaranta V, เฟสเซล เจ. การพึ่งพาไกลโคไลซิสทำให้เมลาโนมาที่กลายพันธุ์ของ BRAF ไวต่อการตอบสนองต่อการยับยั้ง BRAF เป้าหมายที่เพิ่มขึ้น ตัวแทนวิทย์. 2017 2/16/2017 7: 42604 PMID: 28205616, PMCID: PMC5311997, PII: srep42604, DOI: 10.1038 / srep42604, ISSN: 2045-2322

Viquez OM, Yazlovitskaya EM, Tu T, Mernaugh G, Secades P, McKee KK, Georges-Labouesse E, De Arcangelis A, Quaranta V, Yurchenco P, Gewin LC, Sonnenberg A, Pozzi A, Zent R. Integrin alpha6 รักษาความสมบูรณ์ของโครงสร้างของระบบรวบรวมไต Matrix Biol [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2017 ม.ค. 57-58: 244-57 PMID: 28043890, PMCID: PMC5330664, PII: S0945-053X(16)30262-1, DOI: 10.1016/j.matbio.2016.12.003, ISSN: 1569-1802

ฝรั่งเศส OE, Tyson DR, Konvinse KC, Udyavar AR, Estrada L, Quaranta V, Crawford SE, เฮย์เวิร์ด SW. การส่งสัญญาณ TGF-a/ß ที่เปลี่ยนไปทำให้เกิดความร่วมมือระหว่างประชากรเซลล์มะเร็งเต้านม FASEB J [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2016 ต.ค. 30(10): 3441-52 PMID: 27383183, PMCID: PMC5024699, PII: fj.201500187RR, DOI: 10.1096/fj.201500187RR, ISSN: 1530-6860

Harris LA, Frick PL, Garbett SP, Hardeman KN, Paudel BB, Lopez CF, Quaranta V, ไทสัน ดร. ตัวชี้วัดที่เป็นกลางของผลของยาต้านการงอกขยายในหลอดทดลอง แนท. วิธีการ [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2016 มิ.ย. 13(6): 497-500. PMID: 27135974, PMCID: PMC4887341, PII: nmeth.3852, DOI: 10.1038/nmeth.3852, ISSN: 1548-7105

ฟริก พีแอล, เพาเดล บีบี, ไทสัน ดีอาร์, Quaranta V. การหาปริมาณความแตกต่างและพลวัตของสมรรถภาพของโคลนเพื่อตอบสนองต่อสิ่งรบกวน เจเซลล์. Physiol. 2015 ก.ค. 230(7): 1403-12. PMID: 25600161 ดอย: 10.1002/jcp.24888 ISSN: 1097-4652

Hormuth DA, Weis JA, Barnes SL, Miga MI, Rericha EC, Quaranta V, แยงกี้ลอฟ TE. การทำนายการเจริญเติบโตของ glioma ในร่างกายด้วยสมการการแพร่กระจายของปฏิกิริยาที่ถูกจำกัดโดยข้อมูลการถ่ายภาพด้วยคลื่นสนามแม่เหล็กเชิงปริมาณ Phys Biol. 2015 มิ.ย. 6/4/2015 12(4): 46006 PMID: 26040472, PMCID: PMC4486062, DOI: 10.1088/1478-3975/12/4/046006, ISSN: 1478-3975

Yazlovitskaya EM, Tseng HY, Viquez O, Tu T, Mernaugh G, McKee KK, Riggins K, Quaranta V, Pathak A, Carter BD, Yurchenco P, Sonnenberg A, Böttcher RT, Pozzi A, Zent R. Integrin a3ß1 ควบคุมการพัฒนาท่อรวบรวมไตผ่านโพลียูบิควิทิเนชัน K63 ที่เชื่อมโยงกับ TRAF6 ของ Akt มล. ไบโอล. เซลล์ [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2015 พฤษภาคม 5/15/2015 26(10): 1857-74. PMID: 25808491, PMCID: PMC4436831, PII: mbc.E14-07-1203, DOI: 10.1091/mbc.E14-07-1203, ISSN: 1939-4586

แยงกี้ลอฟ TE, Quaranta V, อีแวนส์ เคเจ, รีริชา อีซี. สู่ศาสตร์แห่งการพยากรณ์เนื้องอกสำหรับเนื้องอกวิทยาทางคลินิก Cancer Res [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2015 มีนาคม 3/15/2015 75(6): 918-23. PMID: 25592148, PMCID: PMC4359948, PII: 0008-5472.CAN-14-2233, DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-14-2233, ISSN: 1538-7445

Broussard JA, Diggins NL, Hummel S, Georgescu W, Quaranta V, เว็บบ์ ดีเจ. การวิเคราะห์อัตโนมัติของการยึดเกาะของเซลล์-เมทริกซ์ในสภาพแวดล้อม 2 มิติและ 3 มิติ ตัวแทนวิทย์. 2015 มกราคม 1/29/2015 5: 8124 PMID: 25630460, PMCID: PMC4309964, PII: srep08124, DOI: 10.1038 / srep08124, ISSN: 2045-2322

Leander R, อัลเลน EJ, Garbett SP, Tyson DR, Quaranta V. การเปรียบเทียบที่มาและการทดลองของความหนาแน่นของความน่าจะเป็นในการแบ่งเซลล์ เจ. ทฤษฎี. ไบโอล [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2014 ต.ค. 10/21/2014 359: 129-35. PMID: 24931675, PMCID: PMC5488810, PII: S0022-5193(14)00341-5, DOI: 10.1016/j.jtbi.2014.06.004, ISSN: 1095-8541

Quaranta V, ไทสัน ดร. สิ่งที่อยู่ด้านล่าง: การมองข้ามพันธุศาสตร์เนื้องอกแสดงให้เห็นถึงความซับซ้อนของเครือข่ายการส่งสัญญาณที่อยู่ภายใต้ความไวของยา สัญญาณวิทย์. 2013 9/24/2013 6(294): pe32. PMID: 24065144, PII: 6/294/pe32, DOI: 10.1126/scisignal.2004715, ISSN: 1937-9145

Yankeelov TE, Atuegwu N, Hormuth D, Weis JA, Barnes SL, Miga MI, Rericha EC, Quaranta V. แบบจำลองที่เกี่ยวข้องทางคลินิกของการเติบโตของเนื้องอกและการตอบสนองต่อการรักษา Sci Transl Med. 2013 พฤษภาคม 5/29/2013 5(187): 187ps9. PMID: 23720579, PMCID: PMC3938952, PII: 5/187/187ps9, DOI: 10.1126/scitranslmed.3005686, ISSN: 1946-6242

ไทสัน DR, Quaranta V. นอกเหนือจากพันธุศาสตร์ในการรักษามะเร็งเฉพาะบุคคล: การประเมินพลวัตและความแตกต่างของการตอบสนองต่อเนื้องอก ต่อ Med. 2556 5/1/2556 10(3): 221-5. PMID: 24696699, PMCID: PMC3970774, DOI: 10.2217/pme.13.6, ISSN: 1741-0541

ไทสัน DR, Garbett SP, Frick PL, Quaranta V. การเพิ่มจำนวนเศษส่วน: วิธีการ deconvolve พลวัตของประชากรเซลล์จากข้อมูลเซลล์เดียว แนท. วิธีการ [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2555 9 ก.ย. (9): 923-8 PMID: 22886092, PMCID: PMC3459330, PII: nmeth.2138, DOI: 10.1038/nmeth.2138, ISSN: 1548-7105

Takahashi K, Mernaugh RL, ฟรีดแมน DB, Weller R, Tsuboi N, Yamashita H, Quaranta V, Takahashi T. Thrombospondin-1 ทำหน้าที่เป็นแกนด์สำหรับ CD148 tyrosine phosphatase Proc. แนท อคาเด วิทย์. สหรัฐอเมริกา [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2555 2/7 ก.พ. 2555 109(6): 1985-90. PMID: 22308318, PMCID: PMC3277540, PII: 1106171109, DOI: 10.1073/pnas.1106171109, ISSN: 1091-6490

Georgescu W, Wikswo JP, Quaranta V. CellAnimation: เฟรมเวิร์ก MATLAB โอเพ่นซอร์สสำหรับการวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ ชีวสารสนเทศ [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2555 ม.ค. 1/1/2555 28(1): 138-9. PMID: 22121157, PMCID: PMC3244774, PII: btr633, DOI: 10.1093/bioinformatics/btr633, ISSN: 1367-4811

Hassanein M, Weidow B, Koehler E, Bakane N, Garbett S, Shyr Y, Quaranta V. การพัฒนาการทดสอบเชิงปริมาณปริมาณมากสำหรับการดูดซึมกลูโคสในเซลล์มะเร็ง Mol Imaging Biol. 2011 ต.ค. 13(5): 840-52. PMID: 20809209, PMCID: PMC3627351, DOI: 10.1007/s11307-010-0399-5, ISSN: 1860-2002

Xu J, Xie J, Jourquin J, Colvin DC, ทำ MD, Quaranta V, กอร์ เจซี. อิทธิพลของเฟสวัฏจักรเซลล์ต่อค่าสัมประสิทธิ์การแพร่ปรากฏชัดในเซลล์ที่ซิงโครไนซ์ที่ตรวจพบโดยใช้สเปกโทรสโกปีการแพร่กระจายชั่วขณะ Magn Reson Med [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2011 เม.ย. 65(4): 920-6. PMID: 21413058, PMCID: PMC3433804, DOI: 10.1002/mrm.22704, ISSN: 1522-2594

Tripathi M, Potdar AA, Yamashita H, Weidow B, Cummings PT, Kirchhofer D, Quaranta V. ความแตกแยก Laminin-332 โดย matriptase เปลี่ยนแปลงพารามิเตอร์การเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็งต่อมลูกหมาก ต่อมลูกหมาก. 2011 ก.พ. 2/1/2554 71(2): 184-96. PMID: 20672321, PMCID: PMC3669684, DOI: 10.1002/pros.21233, ISSN: 1097-0045

Ocak S, Yamashita H, Udyavar AR, Miller AN, Gonzalez AL, Zou Y, Jiang A, Yi Y, Shyr Y, Estrada L, Quaranta V, แมส พี. ความผิดปกติของจำนวนสำเนาดีเอ็นเอในมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็กเผยให้เห็นการกระตุ้นเส้นทางการยึดเกาะโฟกัส Oncogene [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2010 12/2/2010 29(48): 6331-42. PMID: 20802517, PMCID: PMC4637980, PII: onc2010362, DOI: 10.1038/onc.2010.362, ISSN: 1476-5594

ริกกินส์ เคเอส, เมอร์นอห์ จี, ซู วาย, Quaranta V, Koshikawa N, Seiki M, Pozzi A, Zent R. MT1-MMP-mediated basement membrane remodeling ปรับเปลี่ยนการพัฒนาของไต ประสบการณ์ Cell Res [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2010 ต.ค. 10/15/2010 316(17): 2993-3005 PMID: 20727881, PMCID: PMC2945451, PII: S0014-4827(10)00397-6, DOI: 10.1016/j.yexcr.2010.08.003, ISSN: 1090-2422

Gruver JS, Potdar AA, Jeon J, Sai J, Anderson B, Webb D, ริชมอนด์เอ, Quaranta V, คัมมิงส์ PT, ชุง CY. การวิเคราะห์แบบ Bimodal เผยให้เห็นกฎการปรับขนาดทั่วไปที่ควบคุมการเคลื่อนที่ของเซลล์แบบไม่มีทิศทางและแบบเคมี ชีวฟิสิกส์ NS. 2010 ก.ค. 7/21/2010 99(2): 367-76. PMID: 20643054, PMCID: PMC2905119, PII: S0006-3495(10)00710-1, DOI: 10.1016/j.bpj.2010.03.073, ISSN: 1542-0086

Yamashita H, Tripathi M, Harris MP, Liu S, Weidow B, Zent R, Quaranta V. บทบาทของชิ้นส่วนลูกผสมของลามินิน-332 ในการจับ การแพร่กระจายและการย้ายถิ่นของเซลล์ที่ขึ้นกับ alpha3beta1 ของ integrin วัสดุชีวภาพ [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2010 31 กรกฎาคม(19): 5110-21. PMID: 20347131, PMCID: PMC2861493, PII: S0142-9612(10)00343-1, DOI: 10.1016/j.biomaterials.2010.03.003, ISSN: 1878-5905

Yamashita H, Shang M, Tripathi M, Jourquin J, Georgescu W, Liu S, Weidow B, Quaranta V. การทำแผนที่ Epitope ของโมโนโคลนัลแอนติบอดีที่ขัดขวางการทำงาน CM6 เสนอแนะไซต์การจับอินทิกริน "อ่อนแอ" บนโดเมน laminin-332 LG2 เจเซลล์. Physiol. 2010 มิ.ย. 223 (3): 541-8 PMID: 20301201, PMCID: PMC2874318, DOI: 10.1002/jcp.22107, ISSN: 1097-4652

Quaranta V, การ์เบตต์ เอสพี. เสียงรบกวนทั้งหมดไม่สูญเปล่า แนท. วิธีการ. 2010 7 เมษายน(4): 269-72. PMID: 20354516, PII: nmeth0410-269, DOI: 10.1038/nmeth0410-269, ISSN: 1548-7105

Liu S, Yamashita H, Weidow B, ผู้ประกอบ AM, Quaranta V. ปฏิสัมพันธ์ระหว่าง Integrin Laminin-332-beta1 ส่งผลเสียต่อ invadopodia เจเซลล์. Physiol. 2010 เม.ย. 223(1): 134-42. PMID: 20039268, PMCID: PMC3150482, DOI: 10.1002/jcp.22018, ISSN: 1097-4652

จอน เจ, Quaranta V, คัมมิงส์ ปตท. โมเดลไฮบริดแบบไม่ต่อเนื่องแบบต่อเนื่องของการเจริญเติบโตและการบุกรุกของเนื้องอก ชีวฟิสิกส์ NS. 2010 ม.ค. 1/6/2010 98(1): 37-47. PMID: 20074513, PMCID: PMC2800960, PII: S0006-3495(09)01573-2, DOI: 10.1016/j.bpj.2009.10.002, ISSN: 1542-0086

Potdar AA, Jeon J, ผู้ประกอบ AM, Quaranta V, คัมมิงส์ ปตท. เซลล์เยื่อบุผิวของเต้านมของมนุษย์แสดงรูปแบบการเดินแบบสุ่มที่มีความสัมพันธ์แบบสองมิติ PLOS ONE. 2010 5(3): e9636. PMID: 20224792, PMCID: PMC2835765, DOI: 10.1371/journal.pone.0009636, ISSN: 1932-6203

Yamashita H, Tripathi M, Jourquin J, Kam Y, Liu S, Weidow B, Quaranta V. Lysophosphatidic Acid Upregulates Laminin-332 Expression ระหว่าง A431 Cell Colony Dispersal J Oncol [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2010 2010: PMID: 20862207, PMCID: PMC2938436, DOI: 10.1155/2010/107075, ISSN: 1687-8469

เดา CM, Quaranta V. การกำหนดบทบาทของลามินิน-332 ต่อมะเร็ง Matrix Biol [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2009 28 ต.ค.(8): 445-55. PMID: 19686849, PMCID: PMC2875997, PII: S0945-053X(09)00103-6, DOI: 10.1016/j.matbio.2009.07.008, ISSN: 1569-1802

ไฮโนว์ พี, เกอร์ลี พี, แมคคอว์ลีย์ แอลเจ, Quaranta V, Cibanu M, Wang S, Graham JM, Ayati BP, Claridge J, Swanson KR, Loveless M, Anderson AR แบบจำลองเชิงพื้นที่ของปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์เนื้องอก: การใช้เคมีบำบัด คณิตศาสตร์ Biosci Eng. 2009 6 ก.ค.(3): 521-46. PMID: 19566124, PMCID: PMC2981353, ISSN: 1547-1063

Guess CM, Lafleur BJ, Weidow BL, Quaranta V. อัตราส่วนที่ลดลงของ laminin-332 beta3 ต่อ gamma2 subunit mRNA สัมพันธ์กับการพยากรณ์โรคที่ไม่ดีในมะเร็งลำไส้ใหญ่ มะเร็ง Epidemiol. Biomarkers ก่อนหน้า [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2552 18 พฤษภาคม(5): 1584-90. PMID: 19383890, PMCID: PMC2869450, PII: 1055-9965.EPI-08-1027, DOI: 10.1158/1055-9965.EPI-08-1027, ISSN: 1055-9965

แอนเดอร์สัน AR, Rejniak KA, Gerlee P, Quaranta V. การบุกรุกที่ขับเคลื่อนด้วยสิ่งแวดล้อมจุลภาค: การตรวจสอบหลายแบบจำลองหลายแบบ J Math Biol [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2552 เม.ย. 58 (4-5): 579-624 PMID: 18839176 ดอย: 10.1007/s00285-008-0210-2 ISSN: 0303-6812

วัง SE, Xiang B, Zent R, Quaranta V, ปอซซี เอ, อาร์เตกา ซีแอล. การเปลี่ยนรูปแบบเบต้าของปัจจัยการเจริญเติบโตทำให้เกิดการจัดกลุ่มของ HER2 และอินทิกรินโดยกระตุ้นไคเนสการยึดเกาะของ Src-focal และความสัมพันธ์ของตัวรับกับโครงร่างโครงร่าง ต้านมะเร็ง. 2552 1/15 ม.ค. 2552 69(2): 475-82 PMID: 19147560, PMCID: PMC2629389, PII: 69/2/475, DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-08-2649, ISSN: 1538-7445

Quaranta V, Tyson DR, Garbett SP, Weidow B, Harris MP, Georgescu W. ความแปรปรวนของลักษณะเฉพาะของเซลล์มะเร็งที่หาปริมาณโดยกล้องจุลทรรศน์อัตโนมัติที่มีเนื้อหาสูงของเซลล์เดียว ปรุงยา เอนไซม์. 2552 467: 23-57 PMID: 19897088, PMCID: PMC2915824, PII: S0076-6879(09)67002-6, DOI: 10.1016/S0076-6879(09)67002-6, ISSN: 1557-7988.

Tripathi M, Nandana S, Yamashita H, Ganesan R, Kirchhofer D, Quaranta V. Laminin-332 เป็นสารตั้งต้นสำหรับเฮปซิน ซึ่งเป็นโปรตีเอสที่เกี่ยวข้องกับการลุกลามของมะเร็งต่อมลูกหมาก เจ. ไบโอล. เคมี [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2008 11/7/51 พฤศจิกายน 2551 283(45): 30576-84 PMID: 18784072, PMCID: PMC2576550, PII: M802312200, DOI: 10.1074/jbc.M802312200, ISSN: 0021-9258

Quaranta V, Rejniak KA, Gerlee P, Anderson AR การบุกรุกเกิดขึ้นจากการปรับตัวของเซลล์มะเร็งไปสู่สภาพแวดล้อมจุลภาคที่แข่งขันกัน: การทำนายเชิงปริมาณจากแบบจำลองทางคณิตศาสตร์หลายระดับ เซมิน. Cancer Biol [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2008 ต.ค. 2561 (5): 338-48 PMID: 18524624, PMCID: PMC3789515, PII: S1044-579X(08)00039-4, DOI: 10.1016/j.semcancer.2008.03.018, ISSN: 1096-3650

Harris MP, Kim E, Weidow B, Wikswo JP, Quaranta V. การย้ายถิ่นของสายเซลล์ไอโซเจนิกเชิงปริมาณโดยการวิเคราะห์หลายตัวแปรแบบไดนามิกของการเคลื่อนที่ของเซลล์เดียว เซลล์ Adh Migr. 2008 2 เม.ย. 2551: 127-36 PMID: 19271355, PMCID: PMC2634586, ISSN: 1933-6926

แอนเดอร์สัน เออาร์, Quaranta V. เนื้องอกวิทยาทางคณิตศาสตร์เชิงบูรณาการ แนท. รายได้มะเร็ง. 2008 มี.ค. 8(3): 227-34. PMID: 18273038, PII: nrc2329, DOI: 10.1038 / nrc2329, ISSN: 1474-1768

Georgescu W, Jourquin J, Estrada L, Anderson AR, Quaranta V, วิกส์โว เจ. การโฟกัสอุทกพลศาสตร์ที่ควบคุมโดยแบบจำลองเพื่อสร้างการไล่ระดับที่ทับซ้อนกันหลายชั้นของโปรตีนที่ตรึงพื้นผิวในอุปกรณ์ไมโครฟลูอิดิก Lab Chip [การพิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2008 ก.พ. 8(2): 238-44. PMID: 18231661, PMCID: PMC4357342, DOI: 10.1039/b716203k, ISSN: 1473-0197

Kam Y, Guess C, Estrada L, Weidow B, Quaranta V. การทดสอบการบุกรุกแบบวงกลมแบบใหม่เลียนแบบพฤติกรรมการบุกรุกในร่างกายของสายเซลล์มะเร็งและแยกแยะการเคลื่อนที่ของเซลล์เดียวในหลอดทดลอง มะเร็ง BMC. 2008 8: 198 PMID: 18625060, PMCID: PMC2491634, PII: 1471-2407-8-198, DOI: 10.1186/1471-2407-8-198, ISSN: 1471-2407

กอด, Quaranta V, Li D. การสร้างแบบจำลองผลกระทบของการไล่ระดับสารอาหารต่อการเพิ่มจำนวนเซลล์ในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพไมโครฟลูอิดิก เทคโนโลยีชีวภาพ Prog [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2550 23 พ.ย. (6): 1347-54 PMID: 17935347 ดอย: 10.1021/bp070234n, ISSN: 8756-7938

Anderson AR, Weaver AM, คัมมิงส์ PT, Quaranta V. สัณฐานวิทยาของเนื้องอกและวิวัฒนาการฟีโนไทป์ขับเคลื่อนโดยแรงกดดันที่เลือกสรรจากสภาพแวดล้อมจุลภาค เซลล์. 2549 12 ธันวาคม 2549 127 (5): 905-15 PMID: 17129778, PII: S0092-8674(06)01348-1, DOI: 10.1016/j.cell.2006.09.042, ISSN: 0092-8674

Jourquin J, Yang N, Kam Y, Guess C, Quaranta V. การแพร่กระจายของโคโลนีของเซลล์มะเร็งเยื่อบุผิวโดยกรดไลโซฟอสฟาติดิก (LPA) เจเซลล์. Physiol. 2549 ก.พ. 206(2): 337-46 PMID: 16110477 ดอย: 10.1002/jcp.20470 ISSN: 0021-9541

Quaranta V, ผู้ประกอบ AM, คัมมิงส์ PT, แอนเดอร์สัน AR แบบจำลองทางคณิตศาสตร์ของมะเร็ง: อนาคตของการพยากรณ์โรคและการรักษา คลินิก ชิม. Acta. 2548 7/24/2548 ก.ค. 2548 357(2): 173-9 PMID: 15907826, PII: S0009-8981(05)00194-4, DOI: 10.1016/j.cccn.2005.03.023, ISSN: 0009-8981

ฮินเตอร์มันน์ อี, หยาง เอ็น, โอซัลลิแวน ดี, ฮิกกินส์ เจเอ็ม, Quaranta V. Integrin alpha6beta4-erbB2 complex ยับยั้ง haptotaxis โดยการควบคุม E-cadherin cell-cell junctions ใน keratinocytes เจ. ไบโอล. เคมี [พิมพ์อิเล็กทรอนิกส์]. 2548 มี.ค. 3/4/2548 280(9): 8004-15. PMID: 15579904, PII: M406301200, DOI: 10.1074/jbc.M406301200, ISSN: 0021-9258

ฮินเตอร์มันน์ อี, Quaranta V. การเคลื่อนที่ของเซลล์เยื่อบุผิวบนลามินิน-5: การควบคุมโดยการประกอบเมทริกซ์ การสลายโปรตีน อินทิกริน และตัวรับ erbB Matrix Biol. 2547 23 พฤษภาคม (2): 75-85 PMID: 15246107, PII: S0945053X04000289, DOI: 10.1016/j.matbio.2004.03.001, ISSN: 0945-053X.

Bilban M, Ghaffari-Tabrizi N, Hintermann E, Bauer S, Molzer S, Zoratti C, Malli R, Sharabi A, Hiden U, Graier W, Knöfler M, Andreae F, Wagner O, Quaranta V, Desoye G. Kisspeptin-10, decapeptide ที่ได้รับจาก KiSS-1 / metastin เป็นตัวยับยั้งการบุกรุกทางสรีรวิทยาของ trophoblasts หลักของมนุษย์ เจเซลล์. วิทยาศาสตร์. 2004 3/15/2004 117(Pt 8): 1319-28. PMID: 15020672, PII: 117/8/1319, DOI: 10.1242/jcs.00971, ISSN: 0021-9533

Wang, H. , Fu, W. , Im, JH, Zhou, Z., Santoro, SA, Iyer, V. , Dipersio, CM, Yu, QC, Quaranta, V.. เซลล์เนื้องอก alpha3beta 1 integrin และ vascular laminin- 5 ไกล่เกลี่ยการจับกุมและการแพร่กระจายของปอด เจ เซลล์ ไบโอล. 2004 164: 935-41.

เชงค์ เอส Quaranta V. เรื่องเล่าจากไซต์ฝังศพใต้ถุนโบสถ์ [ic] ของเมทริกซ์นอกเซลล์ Trends Cell Biol. 2546 13 ก.ค. (7): 366-75 PMID: 12837607, PII: S0962892403001296, ISSN: 0962-8924

เฮนดริกซ์ เอ็มเจ, เซฟเตอร์ อีเอ, เคิร์ชมันน์ DA, Quaranta V, เซฟเตอร์ รี. การเปลี่ยนแปลงสภาพแวดล้อมจุลภาคโดยเซลล์เนื้องอกเมลาโนมาที่ก้าวร้าว แอน. N.Y. Acad. วิทยาศาสตร์. 2546 พฤษภาคม 995: 151-61 PMID: 12814947 ISSN: 0077-8923

พิริลา อี, ชาราบี เอ, ซาโล ที, Quaranta V, Tu H, Heljasvaara R, Koshikawa N, Sorsa T, Maisi P. Matrix metalloproteinases ประมวลผล laminin-5 gamma 2-chain และควบคุมการย้ายเซลล์เยื่อบุผิว ไบโอเคมี. ชีวฟิสิกส์ ความละเอียด คอมมูน. 2546 เมษายน 2546 / 2546 303(4): 1012-7 PMID: 12684035, PII: S0006291X03004522, ISSN: 0006-291X

Schenk S, Hintermann E, Bilban M, Koshikawa N, Hojilla C, Khokha R, Quaranta V. การจับกับตัวรับ EGF ของชิ้นส่วนคล้าย EGF แบบลามินิน-5 ที่ปลดปล่อยออกมาระหว่างการมีส่วนร่วมของต่อมน้ำนมที่ขึ้นกับ MMP เจ. เซลล์ ไบโอล. 2546 เมษายน 2546 / 2546 161(1): 197-209 PMID: 12695504, PMCID: PMC2172889, PII: jcb.200208145, DOI: 10.1083/jcb.200208145, ISSN: 0021-9525

Gao C, Mao S, Ronca F, Zhuang S, Quaranta V, Wirsching P, Janda KD. การระบุเบื้องต้นของคู่ของแอนติบอดี-รีเซพเตอร์ของมนุษย์ซึ่งจำเพาะต่อเนื้องอกภายในโดยวิธีการฟาจ-ดิสเพลย์ เจ. อิมมูนอล. วิธีการ. 2546 3/1/2546 274(1-2): 185-97 มี.ค. 2546 PMID: 12609544, PII: S0022175902005227, ISSN: 0022-1759

Quaranta, V., Giannelli, G.. การบุกรุกของมะเร็ง:ดูพื้นที่ใกล้เคียงของคุณ เนื้องอก. 2003 89: 343-8.

Schenk, S. , Quaranta, V.. เรื่องเล่าจากไซต์ห้องใต้ดิน [ic] ของเมทริกซ์นอกเซลล์ Trends Cell Biol. 2003 13: 366-75.

Quaranta V. ตัวชี้นำการเคลื่อนไหวในสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอก ความแตกต่าง. 2545 ธ.ค. 70(9-10): 590-8. PMID: 12492500, PII: S0301-4681(09)60468-0, DOI: 10.1046/j.1432-0436.2002.700912.x, ISSN: 0301-4681

Quaranta, V. การเคลื่อนไหวชี้นำในสภาพแวดล้อมจุลภาคของเนื้องอก ความแตกต่าง. 2002 590-8.

Giannelli, G. , Bergamini, C. , Fransvea, E. , Marinosci, F. , Quaranta, V. , และ Antonaci, S.. เซลล์มะเร็งตับในมนุษย์ (HCC) ต้องการทั้ง alpha3beta1 integrin และ matrix metalloproteinases activity สำหรับการย้ายถิ่นและการบุกรุก . Lab Invest. 2001 81: 613-27.

Hintermann, E. , Bilban, M. , Sharabi, A. และ Quaranta, V.. บทบาทการยับยั้งของ alpha6beta 4-associated erbB-2 และ phosphoinositide 3-kinase ใน keratinocyte haptotactic migration ขึ้นอยู่กับ alpha3beta1 integrin เจ เซลล์ ไบโอล. 2001 153: 465-75.

Kiosses, W.B. , Hahn, K.M. , Giannelli, G. , และ Quaranta, V.. การแสดงลักษณะของการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาและโครงร่างเซลล์ในเซลล์เยื่อบุผิวเต้านม MCF10A ที่เคลือบบนแผ่นลามิเนต-5: เปรียบเทียบกับสายเซลล์มะเร็งเต้านม MCF7 คอมมูนติดเซลล์. 2001 8: 29-44.

Seftor, RE, Seftor, EA, Koshikawa, N. , Meltzer, PS, Gardner, LM, Bilban, M. , Stetler-Stevenson, WG, Quaranta, V. และ Hendrix, MJ การทำงานร่วมกันของสาย laminin 5 gamma2, เมทริกซ์ metalloproteinase-2 และเมมเบรน type-1-matrix/metalloproteinase จำเป็นสำหรับการเลียนแบบการสร้างหลอดเลือดของตัวอ่อนโดยเมลาโนมาที่ก้าวร้าว ต้านมะเร็ง. 2001 61: 6322-7.

Shang, M. , Koshikawa, N. , Schenk, S. และ Quaranta, V.. โมดูล LG3 ของ laminin-5 มีจุดยึดสำหรับ integrin alpha3beta1 ที่ส่งเสริมการยึดเกาะ การแพร่กระจาย และการย้ายถิ่นของเซลล์ เจ ไบโอล เคม. 2001 276: 33045-53.

Zent, ​​R. , Bush, KT, Pohl, ML, Quaranta, V. , Koshikawa, N. , Wang, Z. , Kreidberg, JA, Sakurai, H. , Stuart, RO และ Nigam, SK. การมีส่วนร่วมของการรวมลามินิน integrins และ laminin-5 ในการแตกแขนงของ morphogenesis ของ ureteric bud ระหว่างการพัฒนาของไต Dev Biol. 2001 238: 289-302.

Quaranta, V.. การโยกย้ายเซลล์ผ่านเมทริกซ์เมทริกซ์นอกเซลล์ เจ เซลล์ ไบโอล. 2000 ((149)): 1167-79.

Plopper, G.E. , Huff, J.L. , Rust, W.L. , Schwartz, M.A. ,Quaranta, V.. การกระตุ้นด้วยแอนติบอดีของตัวรับ betal integrin ช่วยกระตุ้นการย้ายเซลล์เต้านมที่ขึ้นกับ cAMP บน laminin-5 มล. Cell Biol Res ชุมชน. 2000 4: 129-35.

Mullen, L.M. , Richards, D.W. , Quaranta, V.. หลักฐานที่แสดงว่า laminin-5 เป็นส่วนประกอบของแผ่นรองพื้นฐานภายในของผิวฟัน ซึ่งสนับสนุนการยึดเกาะของเซลล์เยื่อบุผิว J. ปริทันต์ Res. 1999 34: 16-24.

Falk-Marzillier, J. , Domanico, S.Z. , Pelletier, A, Mullen, L. , Quaranta, V.. การกำหนดลักษณะของโมเลกุลที่ซับซ้อนระหว่าง integrin alpha6beta4 และ laminin-5 extracellular matrix Biochem Biophys Res ชุมชน. 1998 251: 49-55.

Giannelli, G. , Falk-Marzillier, J. , Schiraldi, O. , Stetler-Stevenson, W.G. , Quaranta, V.. การเหนี่ยวนำการย้ายเซลล์โดยความแตกแยกของเมทริกซ์ metalloprotease-2 ของลามินิน-5 ศาสตร์. 1997 277: 225-8.

Quaranta, V. , Plopper, G.E. Integrins และ laminins ในการเปลี่ยนแปลงเนื้อเยื่อ ไต Int. 1997 51: 1441-6.

Baker, SE, Hopkinson, SB, Fitchmun, M., Andreason, GL, Frasier, F., Plopper, G., Quaranta, V., Jones, JC Laminin-5 และ hemidesmosomes: บทบาทของ alpha3 chain subunit ใน hemidesmosome ความมั่นคงและการประกอบ เจ เซลล์ วิทย์. 1996 109: 2509-20.

Baker, SE, Hopkinson, SB, Fitchmun, M. , Andereason, GL, Frasier, F. , Plopper, G. , Quaranta, V. , Jones, JC Laminin-5 และ hemidesmosomes: บทบาทของ alpha3 chain subunit ใน hemidesmosome ความมั่นคงและการประกอบ เจ เซลล์ วิทย์. 1996 2509-20.

Baker, S.E. , DiPasquale, A.P. , Stock, E.L. , Quaranta, V. , Fitchmum, M. , Jones, J.C. ผลกระทบทางสัณฐานวิทยาของ laminin-5 ที่ละลายได้ต่อเซลล์เยื่อบุผิวที่เพาะเลี้ยงและการปลูกถ่ายเนื้อเยื่อ ประสบการณ์ ความละเอียดของเซลล์. 1996 228: 262-70.

Plopper, G. , Falker-Marzillier, J. , Glaser, S. , Fitchmum, M. , Giannelli, G. , Romano, T. , Jones, JC, Quaranta, V.. การเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของโมโนโคลนัลแอนติบอดี epitopes บนลามินิน -5r เกิดจากการสัมผัสเซลล์ เจ เซลล์ วิทย์. 1996.

Hormia, M. , Falk-Marzillier, J. , Plopper, G. Tamura, R.N. , Jones, J.C. , Quaranta, V.. การแพร่กระจายอย่างรวดเร็วและการสร้าง hemidesmosome ที่เป็นผู้ใหญ่ใน HaCaT Keratinocytes ที่เหนี่ยวนำโดยการฟักตัวด้วยลามินิน -5r ที่ละลายได้ เจ อินเวสท์ เดอร์มาทอล. 1995 557-61.

Gaietta, G. , Redelmeier, T.E. , Jackson, M.R. , Tamura, R.N. Quaranta, V.. การวัดเชิงปริมาณของ alpha6beta 1 และ alpha6beta 4 integrin internalization ภายใต้เงื่อนไขการเชื่อมโยงข้าม: บทบาทที่เป็นไปได้สำหรับโดเมน alpha6 cytoplasmic เจ เซลล์ วิทย์. 1994 107: 3339-49.

Quaranta, V.,Tamura, ร.น. Collo, G. , Cooper, H.M. , Hormia, M. , Rozzo, C. Gaietta, G. , Starr, L.. หน้าที่ที่โดดเด่นของ alpha6beta4 และ integrins อื่น ๆ ในเซลล์เยื่อบุผิว Intergrins. 1994 141-61.

Quaranta, V. , Collo, G. , Rozzo, C. , Starr, L. , Gaietta, G. , Tamura, R.N. integrin alpha6beta4 ในเซลล์เยื่อบุผิวและเซลล์มะเร็ง อินทิกริน. 1994 147-76.

Collo, G. , Starr, L. , Quaranta, V.. ไอโซฟอร์มใหม่ของ integrin รีเซพเตอร์ laminin alpha 7 beta 1 ถูกควบคุมโดยพัฒนาการในกล้ามเนื้อโครงร่าง เจ. ไบโอล. เคมี. 1993 268: 19019-24.

Quaranta, V.. การแสดงออกของ Integrin และการสร้างความแตกต่างของเซลล์เยื่อบุผิว ผม. โมเลกุลการยึดเกาะของเซลล์. 1993 13-27.

Hormia, M. , Virtanen, I. , Quaranta, V.. การสร้างภูมิคุ้มกันของ intergrin alpha 6 beta 4 ในเยื่อบุผิวบริเวณรอยต่อของเมาส์แนะนำฟังก์ชั่นการทอดสมอทั้งแผ่นฐานภายในและภายนอก เจ เดนท์ เรส. 1992 71: 1503-8.

Quaranta, V. , Jones, J.C. กิจการภายในของอินทิกริน แนวโน้มในชีววิทยาของเซลล์. 1991 1: 2-4.

Tamura, R.N. , Cooper, H.M. , Collo, G. , Quaranta, V.. แวเรียนต์อินทิกรินจำเพาะชนิดเซลล์ที่มีโดเมนไซโตพลาสมิกสายอัลฟาทางเลือก Proc Natl. อคาเด วิทย์ US. 1991 88: 10183-7

ลิขสิทธิ์ &คัดลอก 2021 Vanderbilt University มีปัญหา?
Vanderbilt University ยึดมั่นในหลักการของโอกาสที่เท่าเทียมกันและการดำเนินการยืนยัน


เชิงนามธรรม

เพื่อให้เข้าใจเส้นทางการขนส่งแร่ธาตุสำหรับการหลั่งของเปลือกและเพื่อประเมินความแตกต่างในกิจกรรมของเซลล์ในระหว่างการทำให้เป็นแร่ เราถ่ายภาพด้วยลักษณะพิเศษโครงสร้างแบบ TEM และ FE-SEM ของเซลล์เยื่อบุผิวชั้นนอก (OME) ได้ดำเนินการถ่ายภาพเมื่อ Magellania venosa ตัวอย่างเปลือกฝัง/สลัก ตรึง/ขจัดแคลเซียมด้วยสารเคมี และความดันสูงแช่แข็ง/แทนที่การเยือกแข็งจากตัวอย่าง ส่วนประกอบเปลือกส่วนกลาง และจาก puncta ผลลัพธ์ของการถ่ายภาพได้รับการเสริมด้วยการประเมินทางสัณฐานวิทยาของเศษส่วนปริมาตรของออร์แกเนลล์ที่จับกับเมมเบรน

ที่คณะกรรมการ OME ประกอบด้วยเซลล์หลายชั้น เซลล์เหล่านี้ก่อตัวเป็นส่วนขยายเฉียงซึ่งในส่วนตัดขวางนั้นอยู่ต่ำกว่าชั้นหลักและแบนอยู่ใต้เส้นใย ที่คอมมิชชัน OME เป็นแบบหลายเซลล์ ในบริเวณเปลือกส่วนกลางจะเป็นชั้นเซลล์เดียว เมื่อขาดช่องว่างภายนอกของเชลล์คาร์บอเนตอย่างแข็งขัน เนื่องจากเซลล์ OME สัมผัสโดยตรงกับแคลไซต์ของเส้นใยที่ก่อตัวขึ้น เมื่อสิ้นสุดการหลั่ง เซลล์ OME จะเกาะติดผ่านเฮมิเดสโมโซมปลายแหลมกับเยื่อหุ้มเซลล์เมทริกซ์นอกเซลล์ที่เรียงตามพื้นผิวส่วนปลายของเส้นใย ที่เศษส่วนของปริมาตรของปริมาตรรวมสำหรับถุงน้ำ ไมโทคอนเดรียและไลโซโซมจะสูงกว่าเมื่อเทียบกับบริเวณที่เป็นชั้นเซลล์เดียว ในขณะที่สำหรับเอนโดพลาสมิก-เรติคูลัมและอุปกรณ์กอลจินั้นไม่มีความแตกต่าง

FE-SEM, การถ่ายภาพ TEM เผยให้เห็นการขาดช่องว่างระหว่างเซลล์ OME และเส้นใยที่กำลังพัฒนา นอกจากนี้ ยังไม่มีข้อบ่งชี้สำหรับสารตั้งต้นอสัณฐานภายในเส้นใยเมื่อสารเหล่านี้อยู่ในโหมดการหลั่งสารออกฤทธิ์ ดังนั้น ผลลัพธ์ของเราจึงไม่สนับสนุนการขนส่งแร่ธาตุโดยถุงน้ำจากเซลล์ไปยังบริเวณที่มีการทำให้เป็นแร่ มากกว่าโดยการถ่ายโอนไอออนของคาร์บอเนตผ่านกลไกการขนส่งที่เกี่ยวข้องกับเยื่อหุ้มเซลล์ OME


กำหนดเป้าหมายการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ S-adenosylmethionine ด้วยตัวยับยั้ง allosteric แบบใหม่ของ Mat2A

S-Adenosyl-L-methionine (SAM) เป็นโคแฟกเตอร์ของเอนไซม์ที่ใช้ในปฏิกิริยาการถ่ายโอนเมทิลและการสังเคราะห์โพลิเอมีน การสังเคราะห์ SAM จาก ATP และ L-methionine ดำเนินการโดยกลุ่มเอนไซม์ methionine adenosyltransferase (Mat EC 2.5.1.6) เมไทโอนีนอะดีโนซิลทรานสเฟอเรส 2A (Mat2A) ของมนุษย์ซึ่งเป็นไอโซฟอร์มนอกตับมักถูกควบคุมในมะเร็ง เราระบุตัวยับยั้ง Mat2A, PF-9366 ซึ่งผูกกับไซต์ allosteric บน Mat2A ที่ทับซ้อนกับไซต์ที่มีผลผูกพันสำหรับตัวควบคุม Mat2A, Mat2B การศึกษาที่ใช้ประโยชน์จาก PF-9366 ได้เสนอแนะโหมดทั่วไปของการควบคุม Mat2A allosteric การจับแบบ allosteric ของ PF-9366 หรือ Mat2B เปลี่ยนแปลงบริเวณที่ทำงานของ Mat2A ส่งผลให้มีความสัมพันธ์กันของซับสเตรตเพิ่มขึ้นและการหมุนเวียนของเอนไซม์ลดลง ข้อมูลเหล่านี้สนับสนุนแบบจำลองที่ Mat2B ทำหน้าที่เป็นตัวยับยั้งการทำงานของ Mat2A เมื่อระดับเมไทโอนีนหรือ SAM สูง แต่ยังทำหน้าที่เป็นตัวกระตุ้นของ Mat2A เมื่อระดับเมไทโอนีนหรือ SAM ต่ำ มีการอธิบายการขยายสาขาของการปรับกิจกรรม Mat2A ในเซลล์มะเร็งด้วย


การเข้าถึงเอกสาร

  • อาปา
  • ผู้เขียน
  • BIBTEX
  • ฮาร์วาร์ด
  • มาตรฐาน
  • RIS
  • แวนคูเวอร์

ผลงานวิจัย : ผลงานวารสาร › บทความ › peer-review

T1 - การเปลี่ยนแปลงอย่างมากในการแสดงออกของยีนในรูปแบบต่างๆ ของ Crithidia fasciculata เผยให้เห็นกลไกที่เป็นไปได้สำหรับการยึดเกาะจำเพาะของแมลงในปรสิต kinetoplastid

N1 - ข้อมูลเงินทุน: งานนี้ได้รับการสนับสนุนจากมูลนิธิวิทยาศาสตร์แห่งชาติภายใต้หมายเลขทุน MCB-1651517 ให้กับ MLP https://www.nsf.gov. PennVet Imaging Core (GR) ได้รับการสนับสนุนจาก National Institutes of Health Shared Instrument Grant S10 OD021633-01 ให้กับ Bruce Freedman การศึกษานี้ได้รับการสนับสนุนทางการเงินบางส่วนโดย NIH ให้ AI29646 แก่ SMB, NIH-NHGRI ให้ 5U54HG00307907 แก่ Richard K. Wilson ผู้อำนวยการสถาบัน Genome ที่ Washington University และ NIH-NIAID ให้ AI103858 แก่ PJM ผู้ให้ทุนไม่มีบทบาทในการออกแบบการศึกษา การรวบรวมและวิเคราะห์ข้อมูล การตัดสินใจเผยแพร่ หรือการเตรียมต้นฉบับ ผู้เขียนขอขอบคุณ Emmanual Tetaud สำหรับการจัดหาพลาสมิด pNUS เรารับทราบ Natalia S. Akopyants และ George Lye ผู้เตรียมและดำเนินการควบคุมคุณภาพ DNA (มหาวิทยาลัยวอชิงตัน เซนต์หลุยส์) สำหรับการจัดลำดับจีโนม ขอขอบคุณ Gowthaman Ramasamy และ Sacha Steinbiss สำหรับคำอธิบายประกอบของจีโนม C. fasciculata เราขอขอบคุณ Ana Misic สำหรับความช่วยเหลือในการเตรียมห้องสมุดสำหรับ RNAseq, Daniel Beiting และ Center for Host-Microbial Interactions สำหรับความช่วยเหลือเกี่ยวกับการสร้างและวิเคราะห์ข้อมูล RNAseq และ Henry Neeb สำหรับความช่วยเหลือเกี่ยวกับ R เราขอขอบคุณ David S. Roos สำหรับข้อมูลในโครงการ . เราขอขอบคุณ Omar S. Harb สำหรับความช่วยเหลือในการรับชุดยีน KEGG จาก TriTrypDB ขอขอบคุณ Madeline Malfara, John DiMaio และ Michael Yoder สำหรับความคิดเห็นที่เป็นประโยชน์เกี่ยวกับต้นฉบับ ขอขอบคุณ Elizabeth B. Edgerton สำหรับความช่วยเหลือในการเลี้ยงและบำรุงรักษายุง ลิขสิทธิ์ของผู้จัดพิมพ์: © 2019 Filosa et al.

N2 - Kinetoplastids เป็นกลุ่มของปรสิตที่มีสปีชีส์ที่มีความสำคัญทางการแพทย์หลายชนิด สายพันธุ์ที่ติดเชื้อในมนุษย์เหล่านี้ถ่ายทอดโดยแมลงพาหะนำโรคซึ่งปรสิตได้รับการเปลี่ยนแปลงทางพัฒนาการที่เฉพาะเจาะจง สำหรับแต่ละสปีชีส์ ซึ่งรวมถึงระยะที่ปรสิตเกาะเนื้อเยื่อของแมลงผ่านโครงสร้างคล้ายเฮมิเดสโมโซม แม้ว่าโครงสร้างนี้จะอธิบายลักษณะทางสัณฐานวิทยา แต่ก็ไม่เคยมีการจำแนกลักษณะระดับโมเลกุล เรากำลังใช้ Crithidia fasciculata ซึ่งเป็นปรสิตของแมลงที่ผลิตปรสิตที่เกาะกลุ่มกันจำนวนมากภายในโฮสต์ของยุง เพื่อเป็นแบบจำลอง kinetoplastid เพื่อตรวจสอบทั้งกลไกการเกาะติดและสัญญาณที่จำเป็นสำหรับการสร้างความแตกต่างให้กับรูปแบบการยึดเกาะ ข้อได้เปรียบของ C. fasciculata คือปรสิตที่เกาะติดกันสามารถเกิดขึ้นได้ทั้งในหลอดทดลอง ทำให้สามารถเปรียบเทียบโดยตรงกับรูปแบบการว่ายน้ำที่เพาะเลี้ยงได้ เช่นเดียวกับในสิ่งมีชีวิตภายในยุง เมื่อใช้ RNAseq เราระบุยีนที่เกี่ยวข้องกับการยึดมั่นใน C. fasciculata เนื่องจากยีนเหล่านี้เกือบทั้งหมดมีออร์โธล็อกในสปีชีส์ kinetoplastid อื่น การค้นพบของเราอาจเปิดเผยกลไกของการเกาะติดร่วมกัน ทำให้สามารถตรวจสอบขั้นตอนที่สำคัญในการพัฒนาปรสิตและการแพร่กระจายของโรคได้ นอกจากนี้ dual-RNAseq ยังช่วยให้เราสามารถสำรวจปฏิสัมพันธ์ระหว่างปรสิตกับยุงได้ แม้ว่าการติดเชื้อจะทนได้ดี แต่เปปไทด์ต้านจุลชีพและส่วนประกอบอื่นๆ ของระบบภูมิคุ้มกันที่มีมาแต่กำเนิดของยุงก็ได้รับการควบคุม การค้นพบของเราระบุว่า C. fasciculata เป็นระบบแบบจำลองที่มีประสิทธิภาพสำหรับการตรวจสอบปฏิสัมพันธ์ระหว่างแมลงกับไคเนโทพลาสติด

AB - Kinetoplastids เป็นกลุ่มของปรสิตที่มีสปีชีส์ที่มีความสำคัญทางการแพทย์หลายชนิด สายพันธุ์ที่ติดเชื้อในมนุษย์เหล่านี้ถ่ายทอดโดยแมลงพาหะนำโรคซึ่งปรสิตได้รับการเปลี่ยนแปลงทางพัฒนาการที่เฉพาะเจาะจง For each species, this includes a stage in which parasites adhere to insect tissue via a hemidesmosome-like structure. Although this structure has been described morphologically, it has never been molecularly characterized. We are using Crithidia fasciculata, an insect parasite that produces large numbers of adherent parasites inside its mosquito host, as a model kinetoplastid to investigate both the mechanism of adherence and the signals required for differentiation to an adherent form. An advantage of C. fasciculata is that adherent parasites can be generated both in vitro, allowing a direct comparison to cultured swimming forms, as well as in vivo within the mosquito. Using RNAseq, we identify genes associated with adherence in C. fasciculata. As almost all of these genes have orthologs in other kinetoplastid species, our findings may reveal shared mechanisms of adherence, allowing investigation of a crucial step in parasite development and disease transmission. In addition, dual-RNAseq allowed us to explore the interaction between the parasites and the mosquito. Although the infection is well-tolerated, anti-microbial peptides and other components of the mosquito innate immune system are upregulated. Our findings indicate that C. fasciculata is a powerful model system for probing kinetoplastid-insect interactions.


Phylum Chordata

Animals in the phylum Chordata share five key features that appear at some stage of their development: a notochord, a dorsal hollow nerve cord, pharyngeal slits, a post-anal tail, and an endostyle/thyroid gland that secretes iodinated hormones. In some groups, some of these traits are present only during embryonic development. In addition to containing vertebrate classes, the phylum Chordata contains two clades of “invertebrates”: Urochordata (tunicates, salps, and larvaceans) and Cephalochordata (lancelets). Most tunicates live on the ocean floor and are suspension feeders. Lancelets are suspension feeders that feed on phytoplankton and other microorganisms. The invertebrate chordates will be discussed more extensively in the following chapter.


Promiscuous Males And Choosy Females? Challenging A Classic Experiment

Of the 100 "top science stories for 2012" chosen by Discover Magazine, I am most fascinated by #42: "The Myth of Choosy Women, Promiscuous Men." It reports a serious challenge to an experiment that has remained a touchstone in evolutionary biology for over 50 years.

The study, on fruitfly mating, was done in 1948 by geneticist A.J. Bateman. Bateman showed that the male insects' strategy was to mate with many females, whereas the females' strategy was to be discriminating in their choice of partners. Male reproductive success, in other words, correlated positively with number of mates, but female reproductive success did not.

Now, ecologist and evolutionary biologist Patricia Gowaty and her colleagues Yong-Kyu Kim and Wyatt Anderson have repeated that study. They conclude something startling: Bateman blew it.

Before I explain where they say Bateman went wrong, I need to show how Bateman's conclusions rippled far beyond the scholarly world of fruitfly sex. His findings — promiscuous males, choosy females — seemed to strike a cultural chord. After biologist Robert Trivers cited it in a key 1972 paper on parental investment, the "Bateman principle" turned up everywhere. In my own field of primate behavior, for instance, field researchers expected to see (and thus often did) male primates with highly active sex lives and females who were coy, verging on sexual passivity.

And don't think that humans were left out of this picture. We've all heard it, right? When some big-name male public figure sleeps around, and cheats on his wife, isn't there always someone ready with an evolutionary explanation about vigorous male seed-sowing?

It's not that these Bateman-powered expectations have gone completely uncontested. Anthropologist Sarah Hrdy's 1981 book The Woman That Never Evolved pounded away, with careful field data, at the inaccuracy and sexism of assumptions about coy or passive primate females. As recently as 2009, though, scientists were still at work overturning the idea that Bateman's findings apply universally to humans.

Then along came Gowaty's team to take on the Bateman experiment itself.

In 1948, Bateman created isolated fruitfly populations and allowed free mating to occur within each. His goal was to count up the number of mates that males had, versus females. Back then DNA analysis wasn't available, so he couldn't link offspring with specific parents in that way. Instead, he reasoned that by using adult flies with mutations, he could trace an offspring back to a specific pair of parents. As Gowaty et al. wrote in their 2012 paper, he used "heritable, dramatic, and phenotypically obvious genetic mutations to identify the parents of offspring in small, replicated trial populations." The mutations included things like curly wings, thick bristles and deformed eyes.

Offspring, then, could have a single-dose mutation from either mother or father, or a double-dose, from both parents. (If they had no mutation, their parentage could not be traced.)

But here's where things went awry, as Gowaty et al. discovered when they ran the experiment using Bateman's methods. For one thing, the double-dose mutations seriously impacted offspring survival. "The crucial assumption of Bateman's method," Gowaty et al. wrote, "is that there is no reduction of offspring viability from inheritance of parental markers." But this turned out to be untrue — and because the non-surviving offspring weren't counted in the results, the data was skewed.

Also, Bateman's methods violated Gregor Mendel's laws of genetics. As Gowaty explained in an email message, sent to me on Monday:

Bateman's method over-counted the number of offspring for fathers, because there were more single-mutant offspring that had dad's mutation than mom's mutation. It's elementary, and essential in sexual species, that the number of offspring having Dads must equal the number with Moms.

The upshot? For both these reasons, Bateman didn't, in fact, show in any convincing way that fruitfly males are promiscuous and females are choosy.

The Gowaty et al. paper offers enough technical details to warm a geneticist's heart. For me, the best part is their study's broad implications. As Gowaty told me:

If we failed as a discipline to notice flaws [in the Bateman study], it makes one wonder, do we notice the flaws in other, more modern studies that also have results consistent with status-quo expectations?

Here, then, is a direct link between science and society. Because it made intuitive sense to many people that males would be promiscuous and females choosy, they were "dazzled" (Gowaty et al.'s word) by Bateman's central conclusion. But now, Gowaty told me:

The most important experimental data for the evolutionary justification for the double standard in humans is in question.

You can keep up with more of what Barbara is thinking on Twitter: @bjkingape


บทนำ

An estimated 10 million people worldwide suffer from vision loss caused by corneal damage or disease [1]. For the worst cases, the only available treatment is transplantation with human donor corneal tissue. However, there is a severe shortage of safe, good quality corneal tissue, particularly in the Third World and developing countries, leading to various efforts to develop tissue substitutes. Although numerous fully synthetic materials have been developed as corneal prostheses, it has been shown that materials based upon naturally occurring extracellular matrix macromolecules have enhanced biocompatibility [2]. As an example, we have shown previously that crosslinked collagen matrices made from porcine or bovine collagen, apart from being fully biocompatible, were able to promote regeneration of corneal cells and nerves when implanted into rabbit and pig models [3], [4], [5].

Animal-extracted collagen is both abundant and inexpensive, making it historically the material of choice for numerous biomaterial applications [6]. However, the majority of these extracted proteins is not highly purified and have the potential to cause immune reactions [7]. Collagen extracted from animals also has the potential to transmit infectious agents. The development of recombinant human collagens provides the promise of a safe, predictable and chemically defined source of collagen for biomedical applications [8], [9]. The triple helical recombinant collagens contain the same amino acid sequences and an equivalent extent of proline hydroxylation as naturally occurring human collagens. Hence, these recombinant human collagens have similar properties and a similar degree of stability as natural human collagens. Recombinant type I and type III collagens are now commercially available, and their use has the potential to reduce immune reactions seen when using collagen extracted from animals. For example, when porcine collagen corneal constructs were implanted in mice, a low grade immune reaction was observed [10]. Recombinant collagens would also potentially mitigate the risk of transmission of animal-related infectious agents, especially those of viral or prion origin, and would significantly reduce the lot-to-lot variability that is typically experienced with animal-extracted collagen.

Recombinant collagens can be produced by transfected mammalian cells, insect cells, yeast, Escherichia coli, transgenic tobacco, mice or silk worms [8]. Recombinant collagen, mostly type I, has recently been studied for drug delivery applications [8] and has shown great potential in bone, skin, cartilage and periodontal ligament tissue engineering applications [9].

Type I and type III collagens are believed to be co-distributed in most tissues and probably co-exist in collagen fibrils [11]. Type I collagen forms large-diameter collagen fibrils, e.g. 30–300 nm in human skin [12], while type III collagen forms fine fibrils constituting reticular networks that often surround the larger fibers containing type I molecules [13]. In adult skin, immuno-scanning electron microscopy revealed that small-diameter collagen fibrils (20–40 nm) are labeled with antibodies specific for both type I and type III collagens, but that larger collagen fibrils (≥60 nm) are only labeled with antibodies specific for type I collagen [14].

In our previous work [5], we postulated that recombinant human collagen might be a suitable scaffold for the fabrication of corneal substitutes to be used in the clinical setting. The objectives of this study were to construct and evaluate the ในหลอดทดลอง properties and ในร่างกาย performance of corneal substitutes engineered with crosslinked recombinant fibrillar human collagens type I and type III.


วัสดุและวิธีการ

Cell line and maintenance

The BxPC-3 human pancreatic cancer cell and human embryonic kidney cells (HEK) 293 human embryonic kidney cell lines were obtained from the American Type Culture Collection and were maintained in Roswell Park Memorial Institute culture media (RPMI) and Dulbecco's modified eagles medium (DMEM) high-glucose medium, respectively. The fast growing (FG) human pancreatic cancer cell line has been previously described and was provided by Dr. David Cheresh (University of California, San Diego) and maintained in DMEM high-glucose medium. 9 , 10 All media were supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and 2% penicillin–streptomycin unless otherwise noted. All cells were grown in a humidified incubator at 37°C and 5% CO2.

Liquid chromatography—multidimensional protein identification

BxPC3 cells were serum starved overnight, treated with 200 ng/ml of MSP or vehicle for 15 min and protein lysates collected. Fifteen microgram of RON C-20 antibody (Santa Cruz) was conjugated to 75 μl of A/G Ultralink Beads (Pierce) using the Seize X IP Kit (Pierce). Five milligram of each sample was Immunoprecipitated (IP) with the conjugated beads. Precipitated proteins were loaded onto a biphasic capillary column for multidimensional protein identification (MudPIT) then separated and analyzed by 2D-LC separation in combination with tandem MS as described. 11

Generation of mass spectrometry data

RAW files were generated from mass spectra using XCalibur version 1.4, and ms 2 spectra data extracted using RAW Xtractor (version 1.9.1—available at: http://fields.scripps.edu/?q=content/download). Ms 2 spectral data were searched using the SEQUEST algorithm (version 3.0) against the human IPI database (v3.65) database containing 86,382 sequences concatenated to a decoy database in which the sequences for each entry in the original database was reversed. The resulting ms 2 spectra matches were assembled and filtered using DTASelect (version 1.9). Peptides with cross-correlation scores greater than 2.0 (+1), 2.5 (+2), 4.0 (+3), delta CN scores greater than 0.09 and percent ion match greater than 49% were included in the final dataset. This resulted in a false positive rate of 1.3% at the peptide level. To eliminate decoy database hits, a minimum peptide length of seven amino acids was imposed and protein identification required the matching of at least two peptides per protein.

Cell transfection

To generate stable plectin knockdown cell lines and corresponding green fluorescent protein (GFP) tagged-missense controls, HEK 293-T cells were plated on a p150 plate to a confluency of ∼70% at the time of transfection. On the day of transfection, media was aspirated and replaced with 16 ml of prewarmed Optimem (Invitrogen). Five hundred microliters of prewarmed Optimem without antibiotics was pipetted into two sterile eppendorf tubes. To Tube 1, 80 μl of Lipofectamine 2000 (Invitrogen) was added. To Tube 2, 7 μg of pLKO1 Plec1-SH plasmid, 4.55 μg of rev response element (RRE) plasmid, 1.75 μg of REV plasmid and 2.45 μg of vesicular stomatitis virus glycoprotein (VSVG) plasmid was added. The tubes were inverted five times to mix and then incubated at room temperature for 3 min. The contents in Tube 1 were then added to Tube 2, inverted ten times to mix and then incubated at room temperature for 20 min. This solution was then added dropwise to the HEK 293-T cells. Sixteen hours later, the media was aspirated from the HEK 293-T cells and replaced with 16 ml of fresh complete media. The cells were then incubated at 37° (5% CO2) for 48 hr. Following this period of incubation, the virus-containing media was pipetted into a 50-mL conical vial, centrifuged at 350NS and passed through a 0.45 μm filter. The filtered, virus-containing media was then added directly to FG and BxPC-3 cell lines which had been grown to 60% confluency on P100 dishes. After a 6-hr incubation period, the media was changed. FG and BxPC-3 cells which had been successfully transfected were selected in puromycin-containing growth media over 1–2 weeks.

Cell lysates and immunoblot analysis

Cells were lysed in radioimmunoprecipitation assay buffer (RIPA) containing complete protease inhibitors and PhosSTOP phosphatase inhibitors (Roche Applied Science). The lysates were left on ice for 30 min followed by centrifugation at 15,000NS for 15 min, and then supernatants were collected. Protein concentration was determined using the Micro bicinchoninic acid assay (BCA) Protein Assay kit (Pierce). Immunoblotting was performed using between 5 and 30 μg of lysate. Samples were analyzed on sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) followed by immunoblotting. For immunoprecipitations, 500 μg of cell lysates were incubated with 1 μg of antibody for 30 min on ice followed by the addition of Protein A/G UltraLink Resin (Pierce) for 1 hr at 4°C with rotation. The beads were washed two quick times followed by two 15-min washes in RIPA buffer at 4°C with rotation. After the removal of the final wash, the beads were resuspended in 1× NuPAGE lithium dodecyl sulfate (LDS) sample buffer (Invitrogen) containing 1× NuPAGE sample reducing agent (Invitrogen) and were incubated at 60°C for 30 min to elute the protein from the beads. Samples were analyzed by SDS-PAGE and transferred to a polyvinylidene difluoride membrane (Millipore) for analysis of proteins at 4°C overnight. At this time, the membrane was blocked in blocking buffer (1× tris buffered saline (TBS) + 0.05% Tween + 5% milk) for at least 1 hr. The membrane was then probed with primary antibody. Detection of β-actin (1:10,000 Sigma) served as loading control. Goat anti-mouse–horseradish peroxidase (HRP Chemicon/Millipore) and goat anti-rabbit-HRP (Santa Cruz Biotechnology) were used as secondary antibodies at 1:5,000 dilution. The reaction was developed with Enhanced Chemiluminescence Plus reagent (GE Healthcare). When appropriate, membranes were stripped with Restore Western blot Stripping Buffer (Pierce) according to the manufacturer's specifications and reprobed with primary antibody.

Antibodies

For immunoprecipitation, 1 μg of rabbit anti-RON C-20 (Santa Cruz Biotechnology) or 1 μg of mouse monoclonal anti-hemagglutinin (Santa Cruz Biotechnology) antibody was used. For immunoblotting, the following primary antibodies were used: rabbit anti-RON C-20 (1:500 Santa Cruz Biotechnologies), mouse anti-phospho-Akt (1:500), rabbit anti-Akt (1:1,000), rabbit anti-phospho-Erk (1:1,000), rabbit anti-Erk (1:1,000 Cell Signaling) and mouse anti-plectin (1:1000) (Abcam).

Proximity ligation assay

BxPC3 cells were grown to ∼50% confluence on eight chamber slides (Nunc Lab Tek). Cells were serum starved overnight, then treated with 100 ng/ml of MSP for 15 min. Cells were fixed with paraformaldehyde for 10 min, then permeablized with phosphate buffered saline (PBS) + 0.1% TritonX-100 (PBS-T). Primary antibody labeling was performed using RON C-20 (Santa Cruz Biotechnology) at 1:1,000 dilution and mouse anti-Plectin (Abcam) at 1 μg/ml in PBS-T overnight at 4°C. The proximity ligation assay (PLA) was then performed as previously described. 12 For the RON-Met kinase inhibitor (bristol myers squibb (BMS) 777607, Bristol Myers Squib), serum starved cells were treated with 100 nM of the inhibitor for 1 hr before MSP treatment with BMS being present during MSP stimulation. The phosphoinositide-3 (PI3) kinase inhibitor (LY294002, Cell Signaling) was used on serum starved cells at 50 μM for 1 hr before MSP treatment with the LY294002 compound being present during MSP stimulation. The mitogen-activated protein kinase (MEK) inhibitor U0126 (25 μM) was added to serum starved cells for 1 hr before MSP stimulation (100 ng/ml) with U0126 being present during MSP stimulation.

Immunofluorescence

Cells were plated onto chamber slides (Nunc Lab Tek) to achieve ∼80% confluence. The next day cells were serum starved the overnight followed by treatment with 200 ng/ml of MSP for 15 min for BxPC3s and 30 min for FGs. Chambers were washed with PBS and fixed with 3.7% paraformaldehyde for 10 min. Cells were permeablized with PBS + 0.1% TritonX-100 (PBS-T). Primary antibody labeling was performed using rabbit anti RON C-20 (Santa Cruz Biotechnology) at 1:1,000 dilution and mouse anti-plectin (BD Biosciences) at 1:500 dilution in PBS-T overnight at 4°C. Negative control was comprised of normal mouse and rabbit IgG. Secondary antibodies Alexa goat anti Rabbit 594 and goat anti mouse 488 were used at 1:500 dilution for 1 hr at room temperature. The nucleus was labeled with DAPI. Labeling was visualized using a confocal microscope.

Cell proliferation assay

To determine the effect of RON stimulation on cell proliferation, 5 × 10 3 cells were plated per well in a 96-well plate in 200 μL of appropriate growth medium supplemented with 10% FBS and incubated overnight. The cells were then washed twice with PBS and then appropriate serum free growth media was added. The cells were incubated under these conditions for various time points (0, 24, 48, and 72 hr). Two hours before the designated time point, Alamar Blue (Biosource) was added to a final v/v concentration of 10% and allowed to incubate for 2 hr. An automated fluorescent plate reader at an excitation/emission of 530/590 nm was used to measure the proliferating cell population. For the 0-hr time point, Alamar Blue was added when the complete media was replaced with serum-free media. Cells stimulated with media + 10% FBS served as a positive control for proliferation, whereas media with Alamar Blue alone served as the blank, which was averaged and subtracted from the fluorescent value obtained for each well. Each experiment was done in triplicate and repeated as three independent experiments.

Scratch wound assays

BxPC3 and FG parental or plectin deficient cells were grown in six-well dishes to confluence in complete media. Cells were washed, placed in media containing 0.5% FBS and incubated overnight. The next day, four scratches were made in a plus shape with the end of a p200 barrier pipette tip. Fresh media containing 0.5% FBS was then added to each plate plus either PBS or 100 ng/ml of MSP. Dishes were photographed under ×10 magnification using a Nikon inverted microscope at NS = 0 and, 18 hr for BxPC3 and 16 hr for FG cells. The wound area was calculated using the region setting in SPOT imaging software (SPOT Imaging Solutions). Percent wound coverage was calculated as follows: (1 – (area (μm 2 ) at NS = final hour/area (μm 2 ) at NS = 0)) × 100.


รับทราบ

We thank J. Lewis for isolating e1036, S. George and R. Harrington for initial characterization of e1036, Y. Kohara for vab-19cDNAs, the Kazusa DNA Research Institute for the KIAA0172 cDNA clone, the C. elegans genome consortium for the sequences and cosmid DNAs, A. Fire for GFP vectors, and V. Praitis for her phalloidin staining protocol and SMA-1 antisera. We thank X. Huang, W.-M. Woo and N. Brown for discussions and comments on the manuscript. Some strains used here were obtained from the Caenorhabditis Genetics Center, which is supported by the NIH. YJ is an Assistant Investigator of the HHMI. This work was supported by a grant to ADC from the NIH (GM54657). The GenBank Accession Number for the vab-19 cDNA sequence is AY273823


ดูวิดีโอ: BCH201 record gene regulation (มกราคม 2022).